在進(jìn)行常規(guī)的微生物限度檢查方法之前，必須驗(yàn)證在實(shí)際檢查條件下，所檢測(cè)的樣品及檢驗(yàn)程序不得對(duì)可能存在的各種微生物產(chǎn)生抑制作用。中科檢測(cè)開展微生物限度方法學(xué)驗(yàn)證服務(wù)，同時(shí)具備無菌檢查和微生物限度檢查資質(zhì)能力。
微生物限度方法學(xué)驗(yàn)證目的
是為了確認(rèn)所采用方法適合藥品細(xì)菌、霉菌、酵母菌數(shù)測(cè)定。照驗(yàn)證過的檢查法和檢驗(yàn)條件進(jìn)行供試品細(xì)菌、霉菌、酵母菌數(shù)檢查能保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。驗(yàn)證過程中將會(huì)遇到以下難點(diǎn)問題：
1、藥品中污染的微生物處于不穩(wěn)定狀態(tài)，微生物種類具有不確定性；
2、在藥品生產(chǎn)各個(gè)環(huán)節(jié)中,微生物污染存在著不均勻性；
3、無論是無抑菌性藥物還是抑菌性藥物都要進(jìn)行微生物限度檢查，特別是污染于抑菌藥物中的微生物在一定條件下可以穩(wěn)定存在一段時(shí)間，雖然它們可能受到損傷，但未死亡，如服用至人體內(nèi),當(dāng)條件適宜時(shí)仍可生長(zhǎng)繁殖。
微生物限度方法學(xué)驗(yàn)證方法
依據(jù)微生物計(jì)數(shù)法（中國(guó)藥典2022年版四部1105）；
控制菌檢查法（中國(guó)藥典2022年版四部1106）；
非無菌藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（中國(guó)藥典2022年版四部1107）；
抑菌效力檢查法（中國(guó)藥典2022年版四部1121）檢查。
無菌和微生物限度的區(qū)別
一、檢驗(yàn)要求環(huán)境不同
?。?）微生物限度檢查：微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)以下的局部潔凈度100級(jí)的單向氣流區(qū)進(jìn)行。整個(gè)檢驗(yàn)過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染。
?。?）無菌檢查是在潔凈的A級(jí)單向流通空氣區(qū)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行的。整個(gè)過程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染。必須驗(yàn)證單向氣流區(qū)域和工作臺(tái)的清潔度。生物制品的無菌檢驗(yàn)按照《中國(guó)生物制品規(guī)程》中有關(guān)無菌檢驗(yàn)的規(guī)定執(zhí)行。
二、檢驗(yàn)方法不同
?。?）微生物限度檢查是檢查非處方殺菌劑及其原料、輔料的微生物污染程度的一種方法。
?。?）無菌檢查是指對(duì)藥典規(guī)定的藥品、敷料、縫線、無菌器具等品種進(jìn)行無菌檢查的方法。
三、判斷結(jié)果方法不同
?。?）微生物限度檢查：被檢培養(yǎng)基平均菌落數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基平均菌落數(shù)之比大于70%，菌落大小應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基相同。確定該介質(zhì)的適用性符合規(guī)定。
（2）用需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基4管及真菌培養(yǎng)基2管，分別接種金黃色葡萄球菌、產(chǎn)孢梭菌和白色念珠菌。將一管添加到規(guī)定數(shù)量的試驗(yàn)產(chǎn)品中，并將所有培養(yǎng)基管放置在規(guī)定溫度下3-5天。如果微生物在每種培養(yǎng)基24小時(shí)內(nèi)生長(zhǎng)良好，則試樣沒有抑菌作用。
