?皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗是一種通過重復(fù)接觸某種物質(zhì)后機(jī)體產(chǎn)生的免疫傳遞的皮膚反應(yīng)。?在人類中,這種反應(yīng)可能表現(xiàn)為瘙癢、紅斑、丘疹、水皰等癥狀;而在動物身上,可能只表現(xiàn)為皮膚紅斑和水腫?。
皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗的主要目的是確定化妝品原料或產(chǎn)品是否會引起皮膚變態(tài)反應(yīng)及其程度。它是化妝品安全性毒理學(xué)試驗的重要組成部分,適用于化妝品和新原料的研究及安全評估?。
皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗方法及基本流程
?皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗的主要方法包括皮膚斑貼試驗、劃破試驗、皮內(nèi)試驗和體外皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗。這些試驗方法各有特點,適用于不同類型的變態(tài)反應(yīng)檢測,確保了試驗的準(zhǔn)確性和有效性。?
?。?)?皮膚斑貼試驗?:
受試部位通常選擇上背部脊柱兩側(cè)的正常皮膚。如果皮脂過多,可以用75%乙醇輕輕擦拭,然后用生理鹽水清洗待干?。
將變應(yīng)原按順序置于惰性聚乙烯塑料或鋁制斑試器內(nèi),貼敷在受試部位,并用手掌輕壓以排出空氣。
觀察結(jié)果,通常在48小時后去除斑貼,等待30分鐘后觀察第一次結(jié)果,72小時后再次觀察結(jié)果,必要時可在1周后進(jìn)行第三次觀察?。
?。?)?劃破試驗?:
選擇前臂屈側(cè)為受試部位,局部清潔消毒。
用消毒的種痘刀或針尖劃數(shù)條長0.3~0.5厘米的劃痕,滴生理鹽水1滴,然后將受試物涂于劃痕上,留一劃痕僅滴生理鹽水作陰性對照。
20分鐘后用消毒蒸餾水洗凈劃痕,觀察反應(yīng)變化?。
?。?)?皮內(nèi)試驗?:
選擇前臂屈側(cè)為受試部位,局部清潔消毒。
將欲試抗原以無菌生理鹽水適當(dāng)稀釋,分別吸取0.1毫升注射于受試部位皮內(nèi)。同時注射多種抗原時,應(yīng)在注射部位做標(biāo)記。
觀察結(jié)果,通常在注射后觀察局部反應(yīng)?。
?。?)?體外皮膚變態(tài)反應(yīng)人細(xì)胞系活化試驗(h-CLAT)?:
使用體外培養(yǎng)的人急性單核白血病細(xì)胞(THP-1細(xì)胞),與受試物共暴露24小時后,使用熒光抗體染料對細(xì)胞表面分子CD86、CD54染色并用流式細(xì)胞儀測定。
通過測定細(xì)胞表面標(biāo)志物的改變來評估受試物是否具有致敏性?。