GB 5009.5-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》方法詳解
發(fā)布時(shí)間:2019-07-25
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食物中的蛋白質(zhì)是食品檢測(cè)的主要項(xiàng)目,很多人可能會(huì)好奇,實(shí)驗(yàn)室是如何測(cè)定蛋白質(zhì)的含量的呢?今天就帶大家來(lái)了解一下。
一般來(lái)說(shuō),不同含量蛋白質(zhì)測(cè)定方法是一樣。
步驟一:將樣品和硫酸放一起加熱,利用硫酸脫水性去除樣品水分,并破壞有機(jī)物。有機(jī)物中的C、H反應(yīng)生成二氧化碳和水蒸氣逸出。
也可以選擇在過(guò)程中加入硫酸鉀,與硫酸反應(yīng)生成硫酸氫鉀,從而達(dá)到提高溶液沸點(diǎn)的目的。溫度升高,則可以加速反應(yīng)進(jìn)程。同樣道理,加入硫酸鈉、氰化鉀鹽類也可以達(dá)到相同目的。但必須強(qiáng)調(diào)的是,必須控制好用量,否則溫度太高,會(huì)導(dǎo)致生成的硫酸氫銨被分解,放出氨而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
此外,加入硫酸銅、陽(yáng)化工或硒粉作為催化劑以及加入少量過(guò)氧化氫、次氯酸鈉作為氧化劑,也能加速反應(yīng)進(jìn)行。
步驟二:蒸餾。蒸餾令硫酸銨在堿性條件下釋放氨,但需要注意,加入氫氧化鈉溶液要過(guò)量,還有就是防止溶液中氨氣逸出。
步驟三:蒸餾過(guò)程中釋放的氨,可以用一定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸或標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液進(jìn)行氨的吸收,然后再用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液反滴定過(guò)剩的硫酸或鹽酸溶液,從而計(jì)算出總氮量。
半微量或微量定氮通常用硼酸溶液吸收后,再用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定,硼酸呈微弱酸性,用酸滴定不影響指示劑標(biāo)色反應(yīng),它還有吸收氨的作用。

基本過(guò)程就如上述內(nèi)容,但在檢測(cè)過(guò)程中,還有一些細(xì)節(jié)需要留意。畢竟實(shí)驗(yàn)是嚴(yán)謹(jǐn)?shù)模⑿〉募?xì)節(jié)失誤,都會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏離真值。
1、樣品應(yīng)該是均勻的,如果是固體樣品,應(yīng)事先研磨成粉末狀或細(xì)塊,確保樣品能和溶液均勻混合。
2、樣品放進(jìn)燒杯時(shí),注意別黏附在杯壁,以免造成檢測(cè)結(jié)果偏低。
3、硫酸和硫酸鉀的添加含量必須嚴(yán)格控制,否則溫度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響反應(yīng)。一般來(lái)說(shuō)1克樣品,硫酸鉀與硫酸的比例分別是7克比12毫升。
4、樣品稱樣量并非絕對(duì),根據(jù)蛋白質(zhì)含量可以適當(dāng)增加或減少。
5、加熱過(guò)程宜用小火,保持緩慢沸騰,火力集中在燒瓶底部。溫度升高過(guò)程不應(yīng)太快,否則突然高溫容易造成樣品飛濺,既不安全,也影響檢測(cè)結(jié)果。
6、混合指示劑在堿性溶液中呈綠色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈紅色,如果沒(méi)有溴甲酚綠,可單獨(dú)使用0.1%甲醛紅乙醇溶液。
7、試驗(yàn)完成后,要對(duì)試驗(yàn)儀器進(jìn)行清洗,并定期保養(yǎng)。
8、實(shí)驗(yàn)過(guò)程涉及強(qiáng)酸強(qiáng)堿操作,應(yīng)做好保護(hù)措施,以免發(fā)生危險(xiǎn)。
任何實(shí)驗(yàn)都是嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范的,如果不能掌控整個(gè)流程細(xì)節(jié),做出來(lái)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)就不具備參考價(jià)值。中科檢測(cè)食品理化檢測(cè)項(xiàng)目,經(jīng)過(guò)數(shù)十年經(jīng)驗(yàn)累積,將規(guī)范要求貫徹到每一步的實(shí)驗(yàn)步驟中,確保每一次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確可靠。
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