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病毒保存液病毒滅活效果檢測方法
發(fā)布時間：2022-12-14 241
　　病毒保存液適用于病毒、流感病毒、手足口病毒等常見病毒樣本采集保存運輸工作，是采樣管內(nèi)浸末采樣拭子病毒樣本一種保護病毒的被檢測物質(zhì)的液體，可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位組織樣本，儲存的樣本可用于后續(xù)的核酸提取或純化等臨床實驗。
 
　　病毒保存液通常分為兩種，一種是非滅活型，能夠保護病毒的蛋白和核酸，另一種是滅活型，通常含有滅活病毒的裂解鹽，裂解蛋白而保護核酸。
 
　　中科檢測可開展針對流感病毒、腸道病毒、冠狀病毒、皰疹病毒等病毒保存液病毒滅活效果檢測，病毒保存液檢測可針對不同保存溫度、不同保存時間等不同條件下的病毒活性及病毒滅活率。
 
 

　　病毒保存液病毒滅活效果檢測方法

 

　　1. 試驗對象：

 
　　毒株:甲型流感病毒HINI (VR- 1469)
 
　　細(xì)胞: MDCK細(xì)胞.
 

　　2.試驗步驟：

 
　　1）取樣品病毒保存液（非滅活型） 9.8mL，加入0.2mL病毒原液混勻，分裝若干測試液，存至要求溫度;
 
　　2）保存至對應(yīng)天數(shù)后取出測試液，檢測病毒滴度；
 
　　a）10倍倍比稀釋測試液；
 
　　b）將稀釋液加入含生長至單層的MDCK細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，并設(shè)置正常對照組，加等量培養(yǎng)液；
 
　　c）置于35'C、5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育60 min后棄去上清液，加入雙抗400 IU/mL的維持培養(yǎng)液繼續(xù)孵育3~5天，每天觀察細(xì)胞增長狀況；
 
　　d）當(dāng)接種病毒的MDCK細(xì)胞出現(xiàn)變圓或縮小等病變現(xiàn)象時，記錄產(chǎn)生細(xì)胞病變的情況;
 
　　e）根據(jù)Reed-Muench公式計算半數(shù)感染量TCID50。
 
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