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中國青年報客戶端廣州3月10日電（中青報·中青網(wǎng)記者林潔）“整個實驗室完全密封，與病毒‘零距離’接觸，室內(nèi)處于負(fù)壓狀態(tài)，人流、物流、氣流單向流動，確保在里面的污染物不會泄漏到外面而造成污染?！苯裉?，廣東省醫(yī)院P3實驗室主任專家透露，該院每天400多份新冠肺炎核酸檢測就是在P3實驗室開展，實驗員24小時不間斷地利用分子生物學(xué)技術(shù)檢測病毒。

核酸檢測是確診新冠肺炎的“金標(biāo)準(zhǔn)”，而檢測流程中的每一個環(huán)節(jié)都是精細(xì)活兒。

P3實驗室是生物安全防護三級實驗室，根據(jù)微生物及其毒素的危害程度不同，分為四級。一級最低，四級最高。

其中，一級適用于對健康成年人無致病作用的微生物；二級適用于對人和環(huán)境有中等潛在危害的微生物；三級適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素；四級適用于對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明、尚無有效疫苗或治療方法的致病微生物或其毒素。

在操作中，實驗員面對眼前的樣本，需要“一個一個地揭開蓋子，開蓋加樣和核酸提取”。這是與“病毒”的正面交鋒。

專家介紹，實驗室內(nèi)的檢測流程可分為5個步驟：樣本進入“傳遞窗”——滅活處理——開蓋加樣和核心提取——擴增反應(yīng)判斷結(jié)果——高壓滅菌。

采集的檢測樣本如咽拭子或肛拭子，在進入P3實驗室前就得先進入一個特殊的窗口，這個傳遞窗有不能同時打開的雙重門，保證傳遞樣本時帶進去的空氣被隔離在雙重門中，不污染實驗室外環(huán)境。

樣本在水浴箱經(jīng)半個小時56℃高溫滅活，這樣會使病毒蛋白不再有生理活性，失去感染、致病和繁殖能力，在對樣本進行檢測時相對安全，但是病毒蛋白的基因序列并沒有受到影響。

廣東省醫(yī)院檢驗醫(yī)學(xué)部副主任技師胡亮杉介紹，在標(biāo)本處理間，實驗員拿到滅活后的樣本時，第一個動作就是振蕩，盡量讓拭子上的病毒洗脫在培養(yǎng)基溶液中，再靜置5分鐘進行沉淀。

接下來就是開蓋加樣，必須人手操作，而且需要兩個人高度配合才能完成，一人擰開樣本罐蓋子，另一人拿著微量移液器在樣本罐中吸取微量溶液，放到另一個提取管里，一個樣本對應(yīng)一個提取管，再擰上管蓋。

就這樣，400多份樣本要打開瓶蓋吸取轉(zhuǎn)移400多次，每一次都是實驗員與病毒面對面的“開撕”。

“樣本在開蓋轉(zhuǎn)移的過程中，病毒就非常容易暴露在實驗室的空氣中，與我們幾乎就是零距離接觸?！焙辽颊f，開蓋加樣的時候，拿著微量移液器的手往往因為戴著雙重手套，而顯得有些笨拙，可又不得不小心翼翼，再加上眼罩、面屏和生物安全柜玻璃窗的三重阻隔，所有動作都變緩慢，手也因為動作的緩慢勞累而不時顫抖，經(jīng)常是左手扶著右手完成加樣。

人工核酸提取的步驟更是復(fù)雜，考驗的是實驗員的耐心與謹(jǐn)慎?！昂怂崽崛】梢允褂脙x器輔助，但由于比對的需要，往往要人工操作，這需要反復(fù)進行離心、加試劑、洗滌等10多個步驟，其中需要打開管蓋的操作就達(dá)7次以上，完成一例人工核酸提取要50分鐘左右?！焙辽颊f。

提取的核酸送到核酸檢測室內(nèi)，就要上儀器了。提取的核酸加入到擴增試劑中，通過熒光PCR儀進行RT-PCR反應(yīng)，先將提取的核酸逆轉(zhuǎn)錄成DNA，再以DNA為模版，對特定位點進行擴增，利用不同的溫度進行變性、退火和延伸，每個循環(huán)采集熒光值，45個循環(huán)后繪制熒光曲線，用時約110分鐘，實驗員根據(jù)熒光曲線分析判斷結(jié)果的陰性或陽性。

專家表示，任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都可能導(dǎo)致“假陰性”或“假陽性”。在檢測過程中，針對可疑樣本，實驗員會選用不同的試劑進行復(fù)核確定；其次，每進行一批實驗，均會隨機插入3個以上空白對照，針對陽性樣本會進行病毒基因的測序比對，以防止“假陽性”的出現(xiàn)。檢測后，定期隨機抽取檢測后的樣本送第三方實驗室進行檢測，對數(shù)據(jù)進行對比分析，同時也參加相關(guān)部門的室間質(zhì)評，保障檢測的準(zhǔn)確性。

專家介紹，P3檢測團隊目前有21人，70%是碩士以上學(xué)歷，均經(jīng)過分子生物學(xué)的培訓(xùn)和擁有PCR上崗證。截至目前，P3實驗室未出現(xiàn)過生物安全問題，當(dāng)然也與平時訓(xùn)練有關(guān)。

“他們與戰(zhàn)斗在病房里的醫(yī)護人員不同，他們藏在實驗室里，每天與病毒近距離接觸，是別人看不見的‘最前線’。”專家說。

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